실험과정에서 시료의 여러가지 성질차이로 하여 정확한 원심분리방법을 선택해야만 예기한 분리순화결과를 얻을수 있다.자주 사용하는 원심 분리 방법에는 주로 차속 원심법, 밀도 경도 원심법이 있다.그 중 밀도 경도 원심법은 속도 대역 원심과 같은 밀도 경도 원심법으로 세분화할 수 있다.이번 호에서는 원심분리 방법의 차속 원심분리를 구체적으로 소개합니다.

원심 분리 방법의 차이 속원심

차속 원심분리법(differential velocity centrifugation method)은 원심력 차분리법이라고도 한다.

차속 원심법 원리

샘플 중의 각 조분 침강 계수의 차이를 이용하여 서로 다른 미립자에 서로 다른 원심력을 가하고 여러 차례의 원심을 거쳐 원심 속도가 점차 커지며 서로 다른 미립자를 순서대로 침강하여 원심 분리를 실현한다.

차속 원심 원리는 원심력 표현식으로 설명할 수 있다: F = ma, 그중 a = 오메가 2R.

소립경의 미립자는 질량이 작기 때문에 분리할 때 필요한 원심력이 크다.대원심력의 수요를 만족시키기 위해서는 반드시 그 회전속도를 높여야만 분리할수 있다.서로 다른 원심력으로 서로 다른 입경의 미립자를 분리하는 것은 동력학의 분리 방법이며, 특히 침강 속도의 차이가 비교적 큰 미립자는 대부분 이런 분리 방법을 채택한다.

만약 분리 샘플 중에 대중소 세 종류의 서로 다른 입경의 미립자가 있다면, 그것들에 대해 서로 다른 원심력을 가하고, 대립경의 미립자는 그 품질이 비교적 크며, 먼저 침강할 것이다;상청액을 분리하여 더 큰 회전속도로 상청액을 2차 원심분리하여 중입자가 분리된다;다시 상청을 취하여 더 큰 원심력, 더 높은 회전속도, 후에 작은 입자를 침강하여 서로 다른 입자의 분리에 도달한다. 그림 1과 같다.

그림 1 차속 원심분리

각 과립의 침전물에는 항상 일부 차급 과립이 함유되어 있기 때문에, 만약 어떤 과립을 정제하려면 그 과립의 침전물을 희석한 후 다시 원심 침전해야 하며, 결국 이상적인 순도의 과립을 제조할 수 있다.

차속 원심법의 우열세

차속 원심은 주로 직경과 밀도 차이가 큰 입자를 분리하는 데 사용되는데, 그 장점은 분리 시간이 짧고 중복성이 높으며 샘플 처리량이 많아 대량의 샘플의 초기 분리에 사용할 수 있다는 것이다.

그러나 차속 원심법으로 복잡한 샘플을 분리할 때나 분리 순도 요구가 높을 때는 여러 차례 원심분리를 해야 해 조작이 번잡하다.둘째, 침전의 여러 차례 세척, 용해 및 재침전으로 인해 중간 손실을 일으키기 쉬우며 원심 분별력이 떨어지는 문제를 초래할 수 있다;또한 실제 분리 시 원심 분리 시의 대류, 확산 및 수취 침전 시의 오염으로 인해 일부 침강 계수 차이가 크지 않은 성분에 대해서는 *의 분리 정제를 진행할 수 없다.차속 원심법은 샘플의 순도와 회수율 방면의 제한으로 인해 주로 대량의 샘플의 초보적인 분리 정제에 사용되며, 다음 단계의 검측이나 실험을 위해 준비된다.

예를 들어, 우리는 동물의 간 조직 균장액에 대해 여러 차례 다른 상대 원심력과 시간의 원심과 침전/상청 단계별 수집을 진행할 수 있으며, 샘플의 세포핵, 미토콘드리아, 용해효소체와 핵당체 등의 초보적인 분리 부집 침전을 획득하여 다음 단계의 기타 검사 또는 정밀 순화 실험에 사용할 수 있다.구체적인 처리 절차는 다음과 같다.

원심 분리 수업은 연재 중이며, 더 많은 원심 분리 방법을 이해하는 데 지속적으로 관심을 기울이고 있습니다!