호르몬과 신경전달물질 수용체의 활성을 감정하는 형광항체나 유전마커를 제조하는 것은 어려움이 많을 뿐만 아니라 시간도 많이 걸린다.이 문서에서는 흥분제와 그 동원 수용체 (그 중 많은 수용체가 G 단백질로 짝을 이루는 수용체) 의 결합으로 발생하는 생리적 반응 변화를 기록하는 데 사용할 수있는 유용한 대체 방법을 소개합니다.흥분제가 G단백질과 우연히 련결된 수용체와 결합될 때 일련의 쾌속급련반응을 촉발할수 있으며 일반적으로 포내저장부위에서 순식간에 칼시움이온이 방출된다.이전에는 유동식 세포술에서 포내 칼슘 이온 농도 ([Ca2+]i) 의 순간적인 변화를 세포 아군에서의 기능성 수용체 발현을 감정하는 데 사용했는데, 여기서 우리는 새로운 CytoFLEX 분석기의 연동 샘플 전송 시스템이 흥분제 기반 칼슘 이온 연구에 특히 적합하다는 것을 발견했다.에스테르 기반 녹색 형광 칼슘 지시제인 ⸺Fluo-4 AM(LifeTechnologies)을 사용하면 HEK-293 세포가 ATP 자극 반응에서 나타나는 [Ca2+]i 변화를 측정할 수 있다.CytoFLEX 분석기의 파이프라인을 간단히 개선하여 흥분제가 적용된 샘플 파이프에 더 쉽게 들어갈 수 있습니다.이를 더욱 개선하면'정지 시간'검사법을 실시할 수 있다.흥분제 반응을 우리 실험의 생리학적 판정 기준으로 사용함으로써 우리는 기본적으로 수체 감정을 진행하고 그 기능성을 결론적으로 증명할 수 있다.(작성자: Ira Schieren1 Peter Racanelli2 Damian Williams3
소속단위: 1.Howard Hughes 의학 연구소, 컬럼비아 대학 의료 센터 2.Beckman Coulter Inc., Miami, United States 3. 병리학 및 세포 생물학과, 컬럼비아 대학 의료 센터)