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조혈모세포(HSC)는 혈액계를 형성하는 모든 세포를 분화시켜 혈액계 유지에 필수적인 세포다.조혈모세포는 일종의 다기능 줄기세포로 자아갱신 능력을 가지고 있으며 차원 과정을 통해 각종 혈구 계통의 중기 세포를 생성할 수 있어 기체 혈구를 재생성할 수 있다.
줄기세포 감실을 연구하기 위해서는 연구진이 통제된 조건에서 세포군이 성체 세포 계통으로 생성되는 능력을 확인할 수 있어야 한다.실험에서 채택된 전형적인 전략은 HSC가 풍부한 골수를 수용체 생쥐의 혈액계에 이식하는 것이며, 수용체 생쥐의 혈액계는 아치사선량을 조사한 후 사람이 제거하는 것이다.이들 생쥐에서는 성체혈구와 줄기세포, 전체세포가 모두 조사 2주 뒤 죽는다.이식된 세포는 새로운 혈액계를 분화시켜 쥐를 구출할 수 있다.
HSC는 단기(ST-HSC), *(LT-HSC) 및 중기(IT-HSC) 재구축 능력을 기반으로 재분열을 실현할 수 있다 [1, 2].대부분의 보고서에서 연구자들은 이식 수술 후 16~44주의 다양한 시점에서 순환 단핵세포, 입자세포, 림프구를 생성하는 능력을 측정하는 방식으로 LT-HSC를 확정했다.이식 후 세포에 대한 차경쟁적 분석은 이식 수술 후 4~6주 후에 이뤄져야 한다.이식 연구에서 일반적으로 야생형 근교 C57/BL6 생쥐를 사용하지만, 이 생쥐들은 Ptprcb 백혈구 마커 (CD45.2/Ly5.2) 와 같은 유전자를 가지고 있다는 전제가 있다.Sloan Kettering 연구소는 SJL 생쥐와 야생형 C57/BL6 생쥐를 반교하는 방식으로 C57BL/6-Ly5.1로 불리는 동종 품종 생쥐를 배양했다.이 생쥐들은 Ptprcb 백혈구 마커(CD45.1/Ly5.1) 등위 유전자를 갖고 있다.흔히 사용하는 항CD45.1과 CD45.2 항체를 사용하면 연구진은 숙주와 이식세포를 쉽게 감정하고 경쟁적인 실험에서 HSC의 역할을 확인할 수 있다.이 글에서 우리는 간단한 실험을 개괄적으로 묘사하였는데 이 실험의 구체적인 내용은 조사를 받은 쥐를 이식한후 그 외주혈중 Cd45.2-공급체와 CD45.1-숙주백혈구를 측정하는것이다.
(작성자: John F. Woolley, PhD 1, 2Leonardo Salmena, PhD 1, 2
소속단위: 1.캐나다 • 토론토 • 토론토 대학 • 약리학 및 독리학과 2.캐나다 • 토론토 • 대학 건강 네트워크 • 마가렛 프린세스 암 센터)